ملخص وشرح الاختبار
الملاريا مرض ينقله البعوض وينحل بالدم ويسبب الحمى ويصيب أكثر من 200 مليون شخص ويقتل أكثر من مليون شخص كل عام.تسببه أربعة أنواع من المتصورة: المتصورة المنجلية ، المتصورة النشيطة ، المتصورة البيضية ، والمتصورة الملاريا.تصيب هذه المتصورات جميعًا كريات الدم الحمراء البشرية وتدمرها ، مما يؤدي إلى قشعريرة وحمى وفقر دم وضخم الطحال.تتسبب المتصورة المنجلية في حدوث مرض أكثر خطورة من الأنواع المتصورة الأخرى ، كما أنها مسؤولة عن معظم وفيات الملاريا.المتصورة المنجلية والمتصورة النشيطة هما أكثر مسببات الأمراض شيوعًا ، ومع ذلك ، هناك تباين جغرافي كبير في توزيع الأنواع.
تقليديا ، يتم تشخيص الملاريا من خلال إظهار الكائنات الحية على مسحات غيمسا السميكة الملطخة بالدم المحيطي ، وتتميز الأنواع المختلفة من البلازموديوم بظهورها في كريات الدم الحمراء المصابة.هذه التقنية قادرة على التشخيص الدقيق والموثوق ، ولكن فقط عندما يتم إجراؤها من قبل أخصائيي الميكروسكوب المهرة باستخدام بروتوكولات محددة ، مما يمثل عقبات رئيسية للمناطق النائية والفقيرة من العالم.
تم تطوير اختبار Malaria Pf / Pv Ag السريع لحل هذه العقبات.يستخدم الأجسام المضادة الخاصة بـ P. falciparum Histidine Rich Protein-II (pHRP-II) و P. vivax Lactate Dehydrogenase (Pv-LDH) لاكتشاف وتمييز العدوى بـ P. falciparum و P. vivax في وقت واحد.يمكن إجراء الاختبار بواسطة موظفين غير مدربين أو ذوي مهارات محدودة ، بدون معدات معملية
مبدأ
اختبار الملاريا Pf / Pv Ag السريع هو اختبار مناعي كروماتوجرافي للتدفق الجانبي.تتكون مكونات اختبار الشريط من: 1) وسادة مقترنة بلون خمري تحتوي على جسم مضاد لـ Pv-LDH مترافق مع الذهب الغرواني (تقارن Pv-LDH-gold) وجسم مضاد لـ pHRP-II مترافق مع الذهب الغرواني (اتحادات الذهب pHRP-II) ، 2) نطاقات غشاء اختبار النيتروسليلوز (شريطان) وشريط اختبار النيتروسليلوز (شريطان).يتم تغليف النطاق Pv مسبقًا بجسم مضاد آخر مضاد لـ Pv-LDH خاص بالماوس للكشف عن عدوى Pv ، ويتم طلاء النطاق Pf مسبقًا بأجسام مضادة متعددة الأضداد مضادة لـ pHRP-II للكشف عن عدوى Pf ، والشريط C مغلف بـ IgG الماعز المضاد للفأر.
أثناء الفحص ، يتم توزيع كمية كافية من عينة الدم في بئر العينة (S) من شريط الاختبار ، ويضاف محلول تحلل إلى البئر العازلة (B).يحتوي المخزن المؤقت على منظف يزيل خلايا الدم الحمراء ويطلق مستضدات مختلفة ، والتي تهاجر بفعل الشعيرات الدموية عبر الشريط الموجود في الكاسيت.Pv-LDH إذا تم تقديمه في العينة سيرتبط باتحادات الذهب Pv-LDH.يتم بعد ذلك التقاط المركب المناعي على الغشاء بواسطة الجسم المضاد المضاد لـ Pv-LDH المطلي مسبقًا ، مكونًا نطاق Pv بلون خمري ، مما يشير إلى نتيجة اختبار إيجابية Pv.بدلاً من ذلك ، فإن pHRP-II إذا تم تقديمه في العينة سيرتبط بجمعيات pHRP-II-gold.يتم بعد ذلك التقاط المركب المناعي على الغشاء بواسطة الأجسام المضادة المضادة لـ pHRP-II المطلية مسبقًا ، مما يشكل نطاق Pf بلون خمري ، مما يشير إلى نتيجة اختبار إيجابية Pf.يشير عدم وجود أي نطاقات اختبار إلى نتيجة سلبية.يحتوي الاختبار على عنصر تحكم داخلي (نطاق C) والذي يجب أن يُظهر شريطًا بلون خمري من المركب المناعي للماعز IgG / فأر IgG (مضاد لـ Pv-LDH و anti-pHRPII) - اقتران ذهبي بغض النظر عن تطور اللون في أي من نطاقات الاختبار.خلاف ذلك ، تكون نتيجة الاختبار غير صالحة ويجب إعادة اختبار العينة بجهاز آخر.
