ملخص وشرح الاختبار
الملاريا مرض ينقله البعوض وينحل بالدم ويسبب الحمى ويصيب أكثر من 200 مليون شخص ويقتل أكثر من مليون شخص كل عام.تسببه أربعة أنواع من المتصورة: المتصورة المنجلية ، المتصورة النشيطة ، المتصورة البيضية ، والمتصورة الملاريا.تصيب هذه المتصورات جميعًا كريات الدم الحمراء البشرية وتدمرها ، مما يؤدي إلى قشعريرة وحمى وفقر دم وضخم الطحال.تتسبب المتصورة المنجلية في حدوث مرض أكثر خطورة من الأنواع المتصورة الأخرى ، كما أنها مسؤولة عن معظم وفيات الملاريا.المتصورة المنجلية والمتصورة النشيطة هما أكثر مسببات الأمراض شيوعًا ، ومع ذلك ، هناك تباين جغرافي كبير في توزيع الأنواع.
تقليديا ، يتم تشخيص الملاريا من خلال إظهار الكائنات الحية على مسحات غيمسا السميكة الملطخة بالدم المحيطي ، وتتميز الأنواع المختلفة من البلازموديوم بظهورها في كريات الدم الحمراء المصابة.هذه التقنية قادرة على تشخيص دقيق وموثوق ، ولكن فقط عندما يتم إجراؤها من قبل أخصائيي الميكروسكوب المهرة باستخدام بروتوكولات محددة 2 ، مما يمثل عقبات رئيسية للمناطق النائية والفقيرة من العالم.
تم تطوير مجموعة أدوات الاختبار السريع Malaria Pf / Pan Antigen السريع لحل هذه العقبات.يستخدم الاختبار زوجًا من الأجسام المضادة أحادية النسيلة ومتعددة النكلاء لبروتين معين من P. falciparum ، و Histidine Repeat Protein II (pHRP-II) ، وزوجًا من الأجسام المضادة أحادية النسيلة لـ plasmodium Lactate Dehydrogenase (pLDH) ، وهو بروتين تنتجه الأنواع الأربعة من البلازموديوم ، وبالتالي يتيح الكشف والتمايز المتزامن مع P.يمكن إجراؤها بواسطة موظفين غير مدربين أو ذوي مهارات قليلة ، بدون معدات معملية.
مبدأ
مجموعة اختبار Pf / Pan Malaria السريع عبارة عن مقايسة مناعية كروماتوجرافية للتدفق الجانبي.تتكون مكونات شريط الاختبار من: 1) وسادة مقترنة بلون خمري تحتوي على جسم مضاد للماوس مضاد لـ pHRP-II مترافق مع الذهب الغرواني (تقارن pHRP II) وجسم مضاد لـ pLDH للفأر مترافق مع الذهب الغرواني (اتحاد pLDH والذهب) ،
2) شريط غشاء نيتروسليلوز يحتوي على شريطين اختبار (نطاقي Pan و Pv) ونطاق تحكم (نطاق C).يتم تغليف شريط Pan مسبقًا بجسم مضاد أحادي النسيلة مضاد لـ pLDH يمكن من خلاله اكتشاف الإصابة بأي من الأنواع الأربعة من البلازموديا ، ويتم تغليف النطاق Pf مسبقًا بأجسام مضادة متعددة النسيلة مضادة لـ pHRP-II للكشف عن عدوى Pf ، والشريط C مغلف بـ IgG المضاد للفأر من الماعز.
أثناء الفحص ، يتم توزيع كمية كافية من عينة الدم في بئر العينة (S) من شريط الاختبار ، ويضاف محلول تحلل إلى البئر العازلة (B).يحتوي المخزن المؤقت على منظف يحلل خلايا الدم الحمراء ويطلق مستضدات البلازموديوم المختلفة ، والتي تهاجر بفعل الشعيرات الدموية عبر الشريط الموجود في الكاسيت.إذا تم تقديم pHRP-II في العينة فسوف يرتبط مع اتحادات الذهب pHRP II.يتم بعد ذلك التقاط المركب المناعي على الغشاء بواسطة الأجسام المضادة المضادة لـ pHRPII المطلية مسبقًا ، مما يشكل نطاق Pf بلون خمري ، مما يشير إلى نتيجة اختبار Pf إيجابية.إذا تم تقديم pLDH في العينة فسوف يرتبط مع اتحادات الذهب pLDH.يتم بعد ذلك التقاط المركب المناعي على الغشاء بواسطة الجسم المضاد المضاد للـ pLDH المُغلف مسبقًا ، مما يؤدي إلى تكوين شريط بان ذو لون خمري ، مما يشير إلى نتيجة اختبار البلازموديوم الإيجابية.في حالة عدم وجود شريط بان ، يمكن التوصية بنتيجة اختبار إيجابية لأي من البلازموديا الثلاثة الأخرى.
يشير عدم وجود أي نطاقات اختبار (Pan و Pf) إلى نتيجة سلبية.يحتوي الاختبار على عنصر تحكم داخلي (نطاق C) والذي يجب أن يعرض شريطًا بلون خمري من المركب المناعي للماعز IgG / Mouse IgG المضاد للفأر (اتحادات pHRP-II و pLDH-gold) بغض النظر عن تطور اللون في أي من نطاقات الاختبار.خلاف ذلك ، تكون نتيجة الاختبار غير صالحة ويجب إعادة اختبار العينة بجهاز آخر.
