ملخص وشرح الاختبار
داء الليشمانيات الحشوي، أو كالازار، هو عدوى منتشرة تسببها عدة أنواع فرعية من الليشمانية الدونوفانية.وتقدر منظمة الصحة العالمية أن المرض يصيب حوالي 12 مليون شخص في 88 دولة.وينتقل إلى البشر عن طريق لدغات ذبابة الرمل الفاصدة، التي تكتسب العدوى من التغذية على الحيوانات المصابة.وعلى الرغم من أنه مرض موجود في البلدان الفقيرة، إلا أنه أصبح في جنوب أوروبا العدوى الانتهازية الرائدة بين مرضى الإيدز.إن التعرف على كائن الليشمانية الدونوفانية من الدم أو نخاع العظم أو الكبد أو العقد الليمفاوية أو الطحال يوفر وسيلة محددة للتشخيص.الكشف المصلي للمضادات L.تم العثور على donovani IgM ليكون علامة ممتازة لداء الليشمانيات الحشوي الحاد.تشمل الاختبارات المستخدمة في العيادة ELISA أو الأجسام المضادة الفلورية أو اختبارات التراص المباشر 4-5.في الآونة الأخيرة، أدى استخدام بروتين L. donovani المحدد في الاختبار إلى تحسين الحساسية والنوعية بشكل كبير.
اختبار Leishmania IgG/IgM Combo Rapid هو اختبار مصلي يعتمد على البروتين المؤتلف، والذي يكتشف الأجسام المضادة IgG وIgM لـ L. Donovani في وقت واحد.يوفر الاختبار نتيجة موثوقة خلال 15 دقيقة دون أي أدوات.
مبدأ
اختبار الليشمانيا IgG/IgM السريع هو اختبار مناعي كروماتوجرافي للتدفق الجانبي.يتكون شريط الاختبار من: 1) وسادة مترافقة ذات لون بورجوندي تحتوي على مستضد L. donovani المؤتلف مترافق مع الذهب الغرواني (ترافق الليشمانيا) وتقارنات IgG-gold للأرنب، 2) شريط غشاء النيتروسليلوز الذي يحتوي على نطاقي اختبار (نطاقي T1 وT2) ونطاق التحكم (النطاق C).النطاق T1 مطلي مسبقًا بـ IgM أحادي النسيلة المضاد للإنسان للكشف عن الأجسام المضادة لـ L.نطاق donovani IgM، T2 مطلي مسبقًا بكواشف للكشف عن الأجسام المضادة لـ L.donovani IgG، والشريط C مطلي مسبقًا بـ IgG المضاد للأرنب.
عندما يتم توزيع كمية كافية من عينة الاختبار في بئر العينة في الكاسيت، تهاجر العينة عن طريق العمل الشعري عبر الكاسيت.سوف يرتبط L. donovani IgM، إذا كان موجودًا في العينة، بمقترنات الليشمانيا.يتم بعد ذلك التقاط المجمع المناعي على الغشاء بواسطة الجسم المضاد IgM المضاد للإنسان المطلي مسبقًا، مما يشكل شريط T1 ملون بورجوندي، مما يشير إلى نتيجة اختبار L. donovani IgM إيجابية.سوف يرتبط IgG L. donovani، إذا كان موجودًا في العينة، بمقترنات الليشمانيا.يتم بعد ذلك التقاط المعقد المناعي بواسطة الكواشف المغلفة مسبقًا على الغشاء، مما يشكل شريط T2 ذو لون خمري، مما يشير إلى نتيجة اختبار L. donovani IgG إيجابية.
يشير غياب أي نطاقات T (T1 وT2) إلى نتيجة سلبية.يحتوي الاختبار على عنصر تحكم داخلي (نطاق C) والذي يجب أن يُظهر شريطًا ملونًا بورجوندي من المجمع المناعي للماعز المضاد للأرانب IgG/الأرنب IgG-gold بغض النظر عن تطور اللون على أي من نطاقات T.وإلا فإن نتيجة الاختبار غير صالحة ويجب إعادة اختبار العينة بجهاز آخر.
